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可見分光光度計(jì)的工作原理是什么?
點(diǎn)擊次數(shù):7374 更新時(shí)間:2020-09-30
利用可見光等測(cè)定物質(zhì)的吸收光譜,利用此光譜對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析和
物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的方法,稱為分光光度法,使用的儀器是分光光度計(jì)??梢姺止夤舛扔?jì)是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、使用方便的單光束
分光光度計(jì)
,是生物化學(xué)研究中*的基本手段之一??梢姺止夤舛扔?jì)的工作原理是:
當(dāng)一束
單色光
照射待測(cè)物質(zhì)的溶液時(shí),當(dāng)某一定頻率(或波長(zhǎng))的可見光所具有的能量(
hf
)恰好與待測(cè)物質(zhì)分子中的
價(jià)電子
的能級(jí)差相適應(yīng)(即Δ
E=E2-E1=hf
)時(shí),待測(cè)物將對(duì)該頻率(波長(zhǎng))的可見光產(chǎn)生選擇性的吸收。用可見分光光度計(jì)可以測(cè)量和記錄其吸收程度(
吸光度
)。由于在一定條件下,吸光度
A
與待測(cè)物質(zhì)的濃度
C
及吸收地長(zhǎng)度
l
的乘積成正比,即
A
=
KCL
,所以,在測(cè)得吸光度
A
后,可采用
標(biāo)準(zhǔn)曲線法
、
比較法
以及標(biāo)準(zhǔn)加入法等方法進(jìn)行定量分析。
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